Wako:線(xiàn)粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

發(fā)布時(shí)間： 2024-12-09　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1606次

本產(chǎn)品是可在短時(shí)間內(nèi)提取哺乳動(dòng)物組織以及細(xì)胞內(nèi)的線(xiàn)粒體DNA（mtDNA）的試劑盒。此外，還可用于從復(fù)合飼料中提取mtDNA。

◆特點(diǎn)

● 只需少量組織樣品（5 mg），即可提取適用于PCR反應(yīng)的mtDNA。

● 從50 mg組織（250 mg骨骼肌）中提取的mtDNA可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳確認(rèn)。

● 所提取的mtDNA純度高，后續(xù)可用于PCR和限制性?xún)?nèi)切酶酶切分析。

● 可從冷凍組織中提取mtDNA。

● 無(wú)需添加如苯酚、氯仿等有機(jī)溶劑。

◆原理

1. 通過(guò)離心從細(xì)胞裂解液中獲得線(xiàn)粒體斷片。

2. 為除去線(xiàn)粒體斷片中的基因組DNA，本試劑盒采用質(zhì)粒DNA純化中的堿-SDS方法，通過(guò)使基因組DNA堿發(fā)生變性并沉淀析出后，回收mtDNA（環(huán)狀DNA）。

3. 使用碘化鈉令混入的蛋白質(zhì)等變?yōu)榭扇苄晕镔|(zhì)，再通過(guò)洗滌緩沖液純化mtDNA。

◆試劑盒組成

1. Buffer for Homogenate（勻漿緩沖液）

2. DNA Extraction Solution 1

3. DNA Extraction Solution 2(A)

4. DNA Extraction Solution 2(B)

5. DNA Extraction Solution 3

6. 碘化鈉溶液

7. 洗滌液

◆實(shí)驗(yàn)流程

Wako:線(xiàn)粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

◆實(shí)驗(yàn)示例

從小鼠的新鮮組織以及冷凍組織中提取mtDNA

Wako:線(xiàn)粒體DNA提取試劑盒—mtDNA Extractor® CT Kit

從小鼠的新鮮組織中提取的mtDNA，取其中一半用Pst l處理，通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行確認(rèn)。

從小鼠的冷凍組織中提取的mtDNA，取其中一半用Pst l處理，通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行確認(rèn)。

◆使用過(guò)程中的注意事項(xiàng)

由于使用本試劑盒提取的mtDNA量較少，因此需要通過(guò)GelRed™ 染色才能在凝膠上被檢測(cè)出來(lái)。本試劑盒無(wú)法用于溴化乙錠染色檢測(cè)。

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